Verbesserte DNA-Rückverfolgung macht Olivenölverfälschern Angst

Von Julie Butler
, Autorin bei Olive Oil Times | Bericht aus Barcelona

Dr. Juan de Dios Alche und Dr. Fendri Mahdi

Spanische Wissenschaftler behaupten, sie stünden kurz davor, „Ursprungsnachweise“ für natives Olivenöl anzubieten, die ein wirksames Mittel gegen Betrug darstellen würden.

Dank ihrer Fortschritte auf dem Gebiet der DNA-Fingerabdruckanalyse benötigen sie nun nur noch relativ kleine Proben – in der Regel 100–200 ml –, um zu überprüfen, ob natives Olivenöl tatsächlich der angegebenen Sorte und Herkunft entspricht.

Und im Gegensatz zu chemischen und sensorischen Tests – deren Ergebnisse höchstens stark darauf hindeuten können, dass das Öl mit einem anderen Pflanzenöl verschnitten wurde – ist der Nachweis von DNA beispielsweise von Haselnuss- oder Sonnenblumenöl im Olivenöl ein eindeutiger Beweis für dessen Vorhandensein,so die Forscher.

Dr. Juan de Dios Alché, leitender Forscher des Projekts des spanischen Nationalen Forschungsrats (CSIC), erklärte gegenüber der „Olive Oil Times“, dass noch viel Arbeit zu leisten sei, er aber hoffe, dass der Test innerhalb von sechs Monaten auf den Markt kommen werde.

„Wir hatten bereits zahlreiche Anfragen von Akteuren aus der Lebensmittelbranche, unter anderem aus den Vereinigten Staaten, und glauben, dass eine große Nachfrage danach besteht“, sagte er.

Alché, der in der Abteilung für Biochemie des CSIC,„Zell- und Molekularbiologie der Pflanzen“, die zum Institut „Estación Experimental del Zaidín“ in Granada gehört, erklärte außerdem, dass dieser Test andere Verifizierungstests zwar erheblich ergänzen, aber nicht ersetzen würde.

Olive Oil Times:‭ ‬Was sind die Vorteile dieses Tests‭?

Dr. Juan de Dios Alché: Natives Olivenöl ist relativ teuer, und die Menschen sind bereit, für Eigenschaften, die sie schätzen – wie beispielsweise Öl aus einer bestimmten Region oder Sorte –, mehr zu bezahlen, was sich unehrliche Hersteller zunutze machen.Mit diesem Test können wir die Echtheit eines Olivenöls überprüfen und bestätigen, ob es tatsächlich aus der Herkunft und der Sorte bzw. den Sorten stammt, die auf dem Etikett angegeben sind.

F: Was sind die Grenzen dieses Tests?

A:‭ ‬Dieser Test dient nicht dazu, die Güteklasse eines Olivenöls zu bestimmen.‭ ‬Außerdem‭ ‬erfordert er den Nachweis intakter‭ ‬DNA,‭ ‬die in raffiniertem Öl oft nur schwer nachzuweisen ist.‭ ‬Das‭’‬ ist einer der Gründe, warum er für natives Olivenöl konzipiert ist und als Ergänzung zu anderen Tests betrachtet werden sollte,‭ ‬nicht als Ersatz.

Zudem können wir in manchen Fällen Proben nicht eindeutig analysieren, weil sie nur sehr, sehr geringe Mengen an DNA enthalten oder weil die DNA abgebaut ist. In solchen Fällen müssen wir größere Proben verwenden, manchmal bis zu 1 Liter.‭ ‬Die Anwendung hoher Temperaturen während der Ölgewinnung ist eine Ursache für den Abbau der DNA.

F: Wie sind Sie auf die Entwicklung des Tests gekommen?

A:‭ ‬Im Rahmen unserer Forschung zu Pollen haben wir eine umfangreiche Datenbank mit DNA-Fragmenten aus den Blättern von mehr als‭ ‬90‭ ‬verschiedenen Olivensorten aufgebaut,‭ ‬hauptsächlich aus Spanien,‭ ‬Portugal und Tunesien,‭ ‬aber auch mit den gängigsten Sorten aus Italien,‭ ‬Griechenland,‭ ‬Frankreich,‭ ‬Marokko und dem Libanon.

Eine der Anwendungsmöglichkeiten besteht darin, die Olivensorte in Impfstoffen gegen Olivenpollenallergien zu bestätigen, aber wir haben ausprobiert und festgestellt, dass wir damit auch Olivenöl identifizieren können,obwohl in Spanien die gesamte Olivenfrucht, einschließlich des Kerns, zur Ölgewinnung zerkleinert wird und wir nicht genau wissen, woher die darin enthaltene DNA stammt.

F:‭ ‬Ihre Datenbank basiert auf DNA aus Olivenbaumblättern, doch Wissenschaftler haben berichtet, dass die DNA in Blättern eines Olivenbaums nicht mit der des Öls dieses Baums übereinstimmte.

A.‭ ‬Wir haben festgestellt, dass sie in den allermeisten Fällen übereinstimmen.

F: Wie funktioniert der Test?

A: Er basiert auf der Verwendung von Mikrosatelliten (auch bekannt als SSRs – Simple Sequence Repeats) als molekulare Marker.‭ ‬Wir extrahieren‭ ‬DNA‭ ‬und verwenden die sogenannte Polymerasekettenreaktion‭ (‬PCR‭) ‬zur Amplifikation‭ ‬dieser SSR-Sequenzen. Anschließend überprüfen wir ihre Größe durch Sequenzierung und vergleichen die Ergebnisse mit den Einträgen in unserer Datenbank.

Andere molekulare Marker scheinen mittlerweile eine noch höhere Auflösung bei der Fingerabdruckanalyse zu bieten als SSRs, doch wir verwenden weiterhin Mikrosatelliten, da es bereits zahlreiche darauf basierende Datenbanken gibt – wie beispielsweise unsere eigene –, sie einfach zu interpretieren und zu reproduzieren sind und eine hohe Unterscheidungskraft besitzen.

F: Dauert der Test lange und ist die Probenvorbereitung kompliziert?

A: Derzeit dauert es 7–10 Tage, einschließlich der Analyse. Wir extrahieren die DNA mithilfe einer Zentrifuge, Lösungsmitteln und handelsüblichen Kits, die wir angepasst haben, und verwenden für den Test spezielle Laborgeräte, insbesondere einen PCR-Thermocycler und einen Kapillarsequenzer. Die erforderliche Probenvorbereitung ist relativ gesehen nicht allzu kompliziert.

F: Welche Fortschritte haben Sie in den letzten zwei Jahren erzielt?

Abgesehen vom Ausbau der Datenbank haben wir den Prozess der DNA-Extraktion aus Ölproben optimiert.Wir nutzen verschiedene Methoden zur DNA-Extraktion, darunter auch im Handel erhältliche, die wir jedoch angepasst haben, und wir haben zudem den Amplifikationsprozess optimiert.

F: Wäre dieser Test kosteneffizient genug, um in großem Umfang eingesetzt zu werden?

A. Der Preis steht noch nicht fest, da wir unsere Methode noch nicht kommerziell nutzen.‭ ‬Wir haben jedoch festgestellt, dass im Lebensmittelsektor eine Nachfrage danach besteht, und es ist möglich, dass wir den Test in etwa sechs Monaten als Dienstleistung anbieten können – und ja, er wäre erschwinglich.‭ ‬Eine kleine Probe reicht aus, um eine große Ölcharge zu überprüfen.

F: Woran arbeiten Sie derzeit?

Der Test dauert lange, daher versuchen wir, die Dauer zu verkürzen. Außerdem planen wir, eine breitere Palette an Olivenölen zu testen.

Zudem konnten wir zwar DNA von Haselnuss- und Sonnenblumenöl in Olivenöl nachweisen,können wir bislang nur das Vorhandensein von Fremdölen bestätigen, den Anteil jedoch nicht quantifizieren – daran arbeiten wir ebenfalls.

---

Weiterführende Literatur zu molekularen Markern und der Überprüfung der Echtheit von Olivenöl:

– Rückverfolgbarkeit von Olivenöl, Oliven-Keimplasma – Der Olivenanbau, die Tafeloliven- und Olivenölindustrie in Italien, Dr. Innocenzo Muzzalupo (Hrsg.)

– Ein Überblick über die Authentifizierung von Olivenbäumen und Olivenöl

– Leben in den 70er Jahren – Nachweis von Verfälschungen durch Samenöle, Richard Gawel

Quellen:

Entwicklung einer Methode zum Aufspüren potenzieller Olivenölbetrugsfälle. (Pressemitteilung in spanischer Sprache der Versuchsstation Zaidín des spanischen Nationalen Forschungsrats.)
Mit Wissenschaft gegen Lebensmittelbetrug, Chemistry World
– Olivenidentifizierung wird schnell und einfach, Olive Oil Times