Il potenziamento dei sistemi di tracciabilità del DNA mette in allerta gli adulteratori di olio d'oliva

Di Julie Butler
, collaboratrice di Olive Oil Times | Da Barcellona

Il dott. Juan de Dios Alche e il dott. Fendri Mahdi

Gli scienziati spagnoli sostengono di essere vicini a poter offrire dei “test di paternità” per l’olio extravergine di oliva, che rappresenterebbero un potente alleato nella lotta contro le frodi.

I progressi compiuti nell’arte dell’analisi del DNA consentono loro ora di utilizzare solo campioni relativamente piccoli – in genere 100-200 ml – per verificare se l’olio extravergine di oliva sia realmente della varietà e dell’origine dichiarate.

E a differenza delle analisi chimiche e sensoriali — i cui risultati possono al massimo indicare con forte probabilità che l’olio sia stato tagliato con un altro olio vegetale — il rilevamento del DNA, ad esempio, di olio di nocciole o di girasole nell’olio d’oliva costituisce una prova inequivocabile della sua presenza,affermano.

Il dottor Juan de Dios Alché, ricercatore capo del progetto del Consiglio Nazionale delle Ricerche spagnolo (CSIC), ha dichiarato a Olive Oil Times che c’è ancora molto lavoro da fare, ma spera che entro sei mesi il test sia disponibile in commercio.

«Abbiamo già ricevuto diversi contatti da operatori del settore alimentare, anche negli Stati Uniti, e riteniamo che ci sia una forte domanda», ha affermato.

Alché, del dipartimento di Biochimica del CSIC,Biologia cellulare e molecolare delle piante del CSIC, che fa parte dell’istituto Estación Experimental del Zaidín di Granada, ha inoltre spiegato che il test andrebbe a integrare in modo sostanziale, ma non a sostituire, altri test di verifica.

Olive Oil Times:‭ ‬Quali sono i vantaggi di questo test‭?

Dott. Juan de Dios Alché: L’olio d’oliva vergine è relativamente costoso e le persone sono disposte a pagare di più per le qualità a cui attribuiscono valore, come l’olio proveniente da una regione o da una varietà particolare, cosa di cui approfittano i produttori disonesti.Con questo test possiamo verificare l’autenticità di un olio d’oliva, confermando se è realmente della provenienza e della varietà, o delle varietà, indicate sull’etichetta.

D: Quali sono i suoi limiti?

R:‭ ‬Questo test non serve a determinare il grado di un olio d’oliva.‭ ‬Inoltre,‭ ‬richiede il rilevamento di DNA intatto,‭ ‬che spesso è difficile da trovare nell’olio raffinato.‭ ‬Questo è uno dei motivi per cui è stato progettato per essere utilizzato con l’olio d’oliva vergine e dovrebbe essere considerato un complemento ad altri test,‭ ‬non un sostituto.

Inoltre, in alcuni casi non siamo in grado di analizzare con certezza i campioni perché contengono quantità molto, molto ridotte di DNA o perché il DNA è degradato. In tali casi dobbiamo utilizzare campioni più grandi, a volte fino a 1 litro.L’uso di temperature elevate durante la molitura è uno dei fattori che causano la degradazione del DNA.

D:‭ ‬Come siete arrivati a sviluppare il test‭?

R: Nell’ambito della nostra ricerca sul polline abbiamo sviluppato un ampio database di frammenti di DNA prelevati dalle foglie di oltre 90 diverse varietà di olivo, provenienti principalmente dalla Spagna,‭ ‬Portogallo e Tunisia,‭ ‬ma anche delle varietà più comuni provenienti da Italia,‭ ‬Grecia,‭ ‬Francia,‭ ‬Marocco e Libano.

Uno dei suoi utilizzi è quello di certificare la varietà di olivo nei vaccini contro l’allergia al polline d’olivo, ma abbiamo provato e scoperto che potevamo utilizzarlo anche per identificare l’olio d’oliva,‭ ‬anche se in Spagna l’oliva intera,‭ ‬compreso il nocciolo,‭ ‬viene frantumata per produrre l’olio e non sappiamo esattamente da dove provenga il DNA che vi troviamo.

D:‭ ‬Il vostro database si basa sul DNA delle foglie dell’olivo, eppure alcuni scienziati hanno riferito di aver riscontrato che il DNA delle foglie di un olivo non corrispondeva a quello dell’olio dello stesso albero.

R. Abbiamo riscontrato che nella stragrande maggioranza dei casi i due DNA coincidono.

D.‭ ‬Come funziona il test‭?

R: Si basa sull’uso di microsatelliti (noti anche come SSR – Simple Sequence Repeats) come marcatori molecolari.‭ ‬Estraiamo‭ ‬il DNA‭ ‬e utilizziamo la cosiddetta reazione a catena della polimerasi‭ (‬PCR‭) ‬per amplificare‭ ‬queste sequenze SSR. ‭ ‬Successivamente‭ ‬ne verifichiamo la dimensione tramite sequenziamento e confrontiamo le dimensioni con quelle già presenti nel nostro database.

Altri marcatori molecolari sembrano ora fornire un'impronta genetica con una risoluzione ancora maggiore rispetto agli SSR, ma continuiamo a utilizzare i microsatelliti perché esistono già molti database basati su di essi, come il nostro, sono facili da interpretare e riprodurre e hanno un elevato potere discriminatorio.

D: Il test richiede molto tempo e il pretrattamento del campione è complicato?

R: Attualmente occorrono 7-10 giorni, analisi inclusa. Estraiamo il DNA utilizzando una centrifuga, solventi e kit commerciali che abbiamo personalizzato, e per il test utilizziamo attrezzature di laboratorio specializzate, in particolare un termociclatore PCR e un sequenziatore capillare. Il pretrattamento necessario del campione non è poi così complicato, relativamente parlando.

D:‭ ‬Quali progressi avete compiuto negli ultimi due anni‭?

Oltre ad ampliare il database, abbiamo ottimizzato il processo di estrazione del DNA dai campioni di petrolio.‭ ‬Utilizziamo vari metodi per estrarre il DNA,‭ ‬alcuni dei quali disponibili in commercio,‭ ‬ma da noi personalizzati,‭ ‬e abbiamo anche ottimizzato il processo di amplificazione.

D.‭ ‬Questo test sarebbe abbastanza conveniente da poter essere ampiamente utilizzato‭?

R. Il prezzo non è ancora stato stabilito perché non stiamo facendo alcun uso commerciale del nostro metodo.‭ ‬Tuttavia, abbiamo riscontrato una‭ ‬domanda da parte del settore alimentare ed è‭’‬ possibile che tra circa sei mesi saremo‭’‬ in grado di offrirlo come servizio e, sì,‭ ‬sarebbe accessibile.‭ ‬Un piccolo campione è sufficiente per verificare un grande lotto di olio.

D:‭ ‬A cosa state lavorando ora‭?

Il test richiede molto tempo, quindi stiamo cercando di ridurne la durata. Inoltre, intendiamo testare una gamma più ampia di oli d’oliva.

Inoltre,‭ ‬sebbene siamo‭’‬ riusciti a rilevare la presenza di DNA proveniente da oli di nocciola e di girasole nell’olio d’oliva,finora possiamo solo confermare la presenza di oli estranei, ma non siamo in grado di quantificarne la proporzione; quindi è un aspetto su cui stiamo lavorando.

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Ulteriori approfondimenti sui marcatori molecolari e sulla verifica dell’autenticità dell’olio d’oliva:

– Tracciabilità dell’olio d’oliva, germoplasma dell’olivo – La coltivazione dell’olivo, l’industria delle olive da tavola e dell’olio d’oliva in Italia, a cura del dott. Innocenzo Muzzalupo

– Una panoramica sull’autenticazione dell’olivo e dell’olio

– Vivere negli anni ’70 – Individuare l’adulterazione con oli di semi, Richard Gawel

Fonti:

Sviluppata una tecnica per individuare potenziali frodi nell’olio d’oliva. (Comunicato stampa in spagnolo della Stazione Sperimentale di Zaidín del Consiglio Nazionale delle Ricerche spagnolo.)
Combattere le frodi alimentari con la scienza, Chemistry World
L’identificazione delle olive diventa facile e veloce, Olive Oil Times