Η βελτιωμένη ανίχνευση του DNA βάζει τους παρανόμους του ελαιολάδου στην ειδοποίηση

Με την Τζούλι Μπάτλερ
Olive Oil Times Συνεισφέρων | Αναφορά από τη Βαρκελώνη

Ο Δρ Juan de Dios Alche και ο Dr. Fendri Mahdi

Ισπανοί επιστήμονες ισχυρίζονται ότι είναι κοντά στο να προσφέρουν ​"τεστ πατρότητας» για το παρθένο ελαιόλαδο που θα ήταν ισχυρός σύμμαχος κατά της απάτης.

Οι προόδους τους στην τέχνη της λήψης δακτυλικών αποτυπωμάτων DNA σημαίνουν ότι χρειάζονται πλέον μόνο σχετικά μικρά δείγματα - συνήθως 100 – 200 ml - για να επαληθεύσουν εάν το παρθένο ελαιόλαδο είναι πραγματικά της ποικιλίας και της προέλευσης που ισχυρίζεται.

Και σε αντίθεση με τις χημικές και αισθητηριακές δοκιμές - τα αποτελέσματα των οποίων μπορούν το πολύ να υποδεικνύουν ότι το λάδι έχει κοπεί με άλλο φυτικό έλαιο - η εύρεση του DNA ας πούμε φουντουκιού ή ηλιέλαιου στο ελαιόλαδο είναι αναμφισβήτητη απόδειξη της παρουσίας του, λένε.

Ο Δρ Juan de Dios Alché, επικεφαλής ερευνητής στο έργο του Ισπανικού Εθνικού Ερευνητικού Συμβουλίου (CSIC), είπεOlive Oil Times Υπάρχει ακόμη πολλή δουλειά να γίνει, αλλά ελπίζει ότι εντός έξι μηνών η δοκιμή θα είναι διαθέσιμη στο εμπόριο.

"Είχαμε ήδη αρκετές επαφές από ανθρώπους στον τομέα των τροφίμων, συμπεριλαμβανομένων των Ηνωμένων Πολιτειών, και πιστεύουμε ότι υπάρχει μεγάλη ζήτηση για αυτό», είπε.

Alché, από το τμήμα Βιοχημείας, Κυτταρικής και Μοριακής Βιολογίας των Φυτών του CSIC, μέρος τουEstación Experimental del Zaidín ινστιτούτο στη Γρανάδα, εξήγησε επίσης ότι θα συμπληρώσει ουσιαστικά, αλλά όχι θα αντικαταστήσει, άλλες δοκιμές επαλήθευσης.

Olive Oil Times: Ποια είναι τα πλεονεκτήματα αυτού του τεστ;

Δρ Juan de Dios Alché: Το παρθένο ελαιόλαδο είναι σχετικά ακριβό και οι άνθρωποι είναι πρόθυμοι να πληρώσουν περισσότερα για ποιότητες που εκτιμούν, όπως λάδι από μια συγκεκριμένη περιοχή ή ποικιλία, κάτι που εκμεταλλεύονται οι ανέντιμοι παραγωγοί. Με αυτήν τη δοκιμή μπορούμε να επαληθεύσουμε τη γνησιότητα ενός ελαιολάδου, επιβεβαιώνοντας εάν είναι όντως προέλευσης και ποικιλίας ή ποικιλιών που αναφέρονται στην ετικέτα.

Ε: Ποιοι είναι οι περιορισμοί του;

Α: Αυτή δεν είναι μια δοκιμή που θα καθορίσει την ποιότητα ενός ελαιολάδου. Επίσης, απαιτεί ανίχνευση ανέπαφου DNA, το οποίο είναι συχνά δύσκολο να βρεθεί σε εξευγενισμένο λάδι. Αυτός είναι ένας από τους λόγους που έχει σχεδιαστεί για χρήση για παρθένο ελαιόλαδο και πρέπει να θεωρείται ως συμπλήρωμα άλλων δοκιμών, όχι ως αντικατάσταση.

Επίσης, σε ορισμένες περιπτώσεις δεν μπορούμε να αναλύσουμε θετικά τα δείγματα επειδή έχουν πολύ, πολύ μικρές ποσότητες DNA ή επειδή το DNA είναι αποικοδομημένο. Σε τέτοιες περιπτώσεις πρέπει να χρησιμοποιούμε μεγαλύτερα δείγματα, μερικές φορές έως και 1 λίτρο. Η χρήση υψηλών θερμοκρασιών κατά την άλεση είναι ένας τρόπος με τον οποίο αποικοδομείται το DNA.

Ε: Πώς καταλήξατε στην ανάπτυξη του τεστ;

Α: Ως μέρος της έρευνάς μας για τη γύρη, αναπτύξαμε μια μεγάλη βάση δεδομένων με θραύσματα DNA που προέρχονται από φύλλα περισσότερων από 90 διαφορετικών ποικιλιών ελιάς, κυρίως από την Ισπανία, την Πορτογαλία και την Τυνησία, αλλά και με τις πιο κοινές ποικιλίες από Ιταλία, Ελλάδα, Γαλλία, Μαρόκο και Λίβανο.

Μία από τις χρήσεις του είναι η πιστοποίηση της ποικιλίας ελιάς από εμβόλια αλλεργίας στη γύρη της ελιάς, αλλά προσπαθήσαμε και βρήκαμε ότι μπορούσαμε να το χρησιμοποιήσουμε και για την αναγνώριση του ελαιολάδου, παρόλο που στην Ισπανία ολόκληρος ο καρπός της ελιάς, συμπεριλαμβανομένου του σπόρου, συνθλίβεται για να παραχθεί λάδι και δεν ξέρουμε ακριβώς από πού προέρχεται το DNA που βρίσκουμε σε αυτό.

Ε: Η βάση δεδομένων σας βασίζεται σε DNA από φύλλα ελιάς, ωστόσο οι επιστήμονες ανέφεραν ότι το DNA σε φύλλα από μια ελιά δεν ταίριαζε με αυτό του ελαίου του δέντρου.

Α. Έχουμε διαπιστώσει ότι στη συντριπτική πλειοψηφία των περιπτώσεων συμπίπτουν.

Ε. Πώς λειτουργεί το τεστ;

Α: Βασίζεται στη χρήση μικροδορυφόρων (γνωστών και ως SSRs - Simple Sequence Repeats) ως μοριακούς δείκτες. Εξάγουμε DNA και χρησιμοποιούμε αυτό που είναι γνωστό ως αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης (PCR) για να ενισχύσουμε αυτές τις αλληλουχίες SSR. Στη συνέχεια, ελέγχουμε το μέγεθός τους ταξινομώντας και συγκρίνοντας τα μεγέθη με αυτά που υπάρχουν ήδη στη βάση δεδομένων μας.

Άλλοι μοριακοί δείκτες φαίνεται τώρα να παρέχουν δακτυλικά αποτυπώματα ακόμη υψηλότερης ανάλυσης από τους SSR, αλλά εξακολουθούμε να χρησιμοποιούμε μικροδορυφόρους επειδή υπάρχουν ήδη πολλές βάσεις δεδομένων που βασίζονται σε αυτούς, όπως η δική μας, είναι εύκολο να ερμηνευτούν και να αναπαραχθούν και έχουν υψηλή διακριτική δύναμη.

Ε: Διαρκεί πολύ η δοκιμή και είναι περίπλοκη η προεπεξεργασία του δείγματος;

Α: Προς το παρόν χρειάζονται 7 – 10 ημέρες, συμπεριλαμβανομένης της ανάλυσης. Εξάγουμε το DNA χρησιμοποιώντας φυγόκεντρο, διαλύτες και κιτ του εμπορίου που έχουμε προσαρμόσει και χρησιμοποιούμε εξειδικευμένο εργαστηριακό εξοπλισμό για τη δοκιμή, ειδικά θερμοκυκλοποιητή PCR και τριχοειδές sequencer. Η απαραίτητη προεπεξεργασία δείγματος δεν είναι τόσο περίπλοκη, σχετικά μιλώντας.

ΕΡ.: Τι πρόοδο έχετε σημειώσει τα τελευταία δύο χρόνια;

Εκτός από την επέκταση της βάσης δεδομένων, βελτιστοποιήσαμε τη διαδικασία εξαγωγής DNA από δείγματα ελαίου. Χρησιμοποιούμε διάφορες μεθόδους για την εξαγωγή του DNA, μερικές από τις οποίες είναι διαθέσιμες στο εμπόριο, αλλά προσαρμοσμένες από εμάς, και βελτιστοποιήσαμε επίσης τη διαδικασία ενίσχυσης.

Ε. Θα ήταν αυτή η δοκιμή αρκετά οικονομικά αποδοτική ώστε να χρησιμοποιηθεί ευρέως;

Α. Η τιμή δεν έχει καθοριστεί ακόμα, επειδή δεν χρησιμοποιούμε εμπορική χρήση της μεθόδου μας. Όμως, διαπιστώσαμε ότι υπάρχει ζήτηση για αυτήν από τον τομέα των τροφίμων και είναι πιθανό σε περίπου έξι μήνες να μπορούμε να την προσφέρουμε ως υπηρεσία και ναι, θα ήταν προσιτή. Ένα μικρό δείγμα μπορεί να επαληθεύσει μια μεγάλη παρτίδα λαδιού.

Ε: Με τι ασχολείστε τώρα;

Η δοκιμή διαρκεί πολύ, επομένως προσπαθούμε να τη μειώσουμε.Σκοπεύουμε επίσης να δοκιμάσουμε μια ευρύτερη γκάμα ελαιολάδου.

Επιπλέον, ενώ μπορέσαμε να ανιχνεύσουμε DNA από φουντουκέλαια και ηλιέλαια στο ελαιόλαδο, μέχρι στιγμής μπορούμε να επιβεβαιώσουμε μόνο την παρουσία ξένων ελαίων, δεν μπορούμε να ποσοτικοποιήσουμε την αναλογία, επομένως αυτό είναι κάτι που επίσης εργαζόμαστε.

Περαιτέρω ανάγνωση σχετικά με τους μοριακούς δείκτες και επαλήθευση της γνησιότητας του ελαιολάδου:

- Ιχνηλασιμότητα ελαιόλαδου, φύτρο ελιάς — Η καλλιέργεια της ελιάς, η επιτραπέζια ελιά και η βιομηχανία ελαιολάδου στην Ιταλία, Δρ. Innocenzo Muzzalupo (Επιμ.)

- Μια επισκόπηση του ελέγχου ταυτότητας της ελιάς και του λαδιού

- Ζώντας στη δεκαετία του '70 – Ανίχνευση νοθείας από σπορέλαια, Richard Gawel

Πηγές:

Αναπτύχθηκε τεχνική για την ανίχνευση πιθανής απάτης στο ελαιόλαδο. (Δελτίο τύπου στα ισπανικά από τον Πειραματικό Σταθμό Zaidín του Εθνικού Συμβουλίου Ερευνών της Ισπανίας.)
Καταπολέμηση της απάτης στα τρόφιμα με την επιστήμη, Chemistry World
Η αναγνώριση ελιάς γίνεται γρήγορα και εύκολα, Olive Oil Times