Η βελτιωμένη μέθοδος ανίχνευσης μέσω του DNA θέτει σε επιφυλακή τους παραποιητές ελαιολάδου
Ισπανοί επιστήμονες ισχυρίζονται ότι βρίσκονται κοντά στο να προσφέρουν «τεστ πατρότητας» για το παρθένο ελαιόλαδο, τα οποία θα αποτελέσουν ισχυρό όπλο κατά της απάτης.
Από την Julie Butler
, συνεργάτιδα του Olive Oil Times
| Αναφορά από τη Βαρκελώνη
Δρ. Juan de Dios Alche και Δρ. Fendri Mahdi
Ισπανοί επιστήμονες ισχυρίζονται ότι βρίσκονται κοντά στο να προσφέρουν «τεστ πατρότητας» για το παρθένο ελαιόλαδο, τα οποία θα αποτελέσουν ισχυρό όπλο κατά της απάτης.
Οι πρόοδοι που έχουν σημειώσει στην τεχνική της δακτυλοσκοπίας DNA σημαίνουν ότι πλέον χρειάζονται μόνο σχετικά μικρά δείγματα — συνήθως 100-200 ml — για να επαληθεύσουν αν το παρθένο ελαιόλαδο είναι πράγματι της ποικιλίας και της προέλευσης που δηλώνεται.
Και σε αντίθεση με τις χημικές και οργανοληπτικές δοκιμές —τα αποτελέσματα των οποίων μπορούν το πολύ να υποδηλώνουν έντονα ότι το λάδι έχει αναμιχθεί με άλλο φυτικό λάδι— η ανίχνευση DNA, για παράδειγμα, από φουντουκέλαιο ή ηλιέλαιο στο ελαιόλαδο αποτελεί αδιαμφισβήτητη απόδειξη της παρουσίας του, λένε.
Ο Δρ. Juan de Dios Alché, επικεφαλής ερευνητής του προγράμματος του Ισπανικού Εθνικού Συμβουλίου Έρευνας (CSIC), δήλωσε στην Olive Oil Times ότι υπάρχει ακόμη πολλή δουλειά να γίνει, αλλά ελπίζει ότι εντός έξι μηνών η δοκιμή θα είναι διαθέσιμη στο εμπόριο.
«Έχουμε ήδη δεχτεί αρκετές επαφές από ανθρώπους του τομέα των τροφίμων, συμπεριλαμβανομένων και των Ηνωμένων Πολιτειών, και πιστεύουμε ότι υπάρχει μεγάλη ζήτηση για αυτό», είπε.
Ο Alché, από το τμήμα Βιοχημείας του CSIC,«Κυτταρική και Μοριακή Βιολογία Φυτών», που αποτελεί μέρος του Ινστιτούτου Estación Experimental del Zaidín στη Γρανάδα, εξήγησε επίσης ότι το τεστ αυτό θα συμπληρώσει ουσιαστικά, αλλά δεν θα αντικαταστήσει, άλλες δοκιμές επαλήθευσης.
Olive Oil Times: Ποια είναι τα πλεονεκτήματα αυτής της δοκιμής;
Δρ. Juan de Dios Alché: Το παρθένο ελαιόλαδο είναι σχετικά ακριβό και οι καταναλωτές είναι πρόθυμοι να πληρώσουν περισσότερα για χαρακτηριστικά που εκτιμούν, όπως το ελαιόλαδο από μια συγκεκριμένη περιοχή ή ποικιλία, κάτι που εκμεταλλεύονται οι ανέντιμοι παραγωγοί.Με αυτή τη δοκιμή μπορούμε να επαληθεύσουμε την αυθεντικότητα ενός ελαιολάδου, επιβεβαιώνοντας αν πράγματι προέρχεται από την προέλευση και την ποικιλία, ή τις ποικιλίες, που αναγράφονται στην ετικέτα.
Ε: Ποιοι είναι οι περιορισμοί της;
Α: Δεν πρόκειται για δοκιμή που θα καθορίσει την κατηγορία ενός ελαιολάδου. Επίσης, απαιτεί την ανίχνευση άθικτου DNA, το οποίο είναι συχνά δύσκολο να βρεθεί σε ραφιναρισμένο ελαιόλαδο. Αυτός είναι ένας από τους λόγους για τους οποίους έχει σχεδιαστεί για χρήση σε παρθένο ελαιόλαδο και πρέπει να θεωρείται ως συμπλήρωμα άλλων δοκιμών, όχι ως υποκατάστατο.
Επίσης, σε ορισμένες περιπτώσεις δεν είμαστε σε θέση να αναλύσουμε με βεβαιότητα τα δείγματα, επειδή περιέχουν πολύ, πολύ μικρές ποσότητες DNA ή επειδή το DNA έχει υποστεί αποικοδόμηση. Σε τέτοιες περιπτώσεις πρέπει να χρησιμοποιούμε μεγαλύτερα δείγματα, μερικές φορές έως και 1 λίτρο. Η χρήση υψηλών θερμοκρασιών κατά τη διάρκεια της άλεσης είναι ένας από τους τρόπους με τους οποίους το DNA υποβαθμίζεται.
Ε: Πώς καταλήξατε να αναπτύξετε τη δοκιμή;
Α: Στο πλαίσιο της έρευνάς μας για τη γύρη, δημιουργήσαμε μια μεγάλη βάση δεδομένων με θραύσματα DNA που προέρχονταν από τα φύλλα περισσότερων από 90 διαφορετικών ποικιλιών ελιάς, κυρίως από την Ισπανία, Πορτογαλίας και Τυνησίας, αλλά και με τις πιο κοινές ποικιλίες από την Ιταλία, την Ελλάδα, τη Γαλλία, το Μαρόκο και τον Λίβανο.
Μία από τις χρήσεις της είναι η πιστοποίηση της ποικιλίας ελιάς στα εμβόλια κατά της αλλεργίας στη γύρη της ελιάς, αλλά δοκιμάσαμε και διαπιστώσαμε ότι μπορούμε επίσης να τη χρησιμοποιήσουμε για την ταυτοποίηση του ελαιολάδου, παρόλο που στην Ισπανία ολόκληρος ο καρπός της ελιάς, συμπεριλαμβανομένου του πυρήνα, συνθλίβεται για την παραγωγή ελαιολάδου και δεν’ξέρουμε ακριβώς από πού προέρχεται το DNA που εντοπίζουμε σε αυτό.
Ε: Η βάση δεδομένων σας βασίζεται στο DNA από φύλλα ελιάς, όμως επιστήμονες έχουν αναφέρει ότι το DNA που βρέθηκε σε φύλλα ελιάς δεν ταυτιζόταν με αυτό του ελαιολάδου του δέντρου.
Α. Έχουμε διαπιστώσει ότι στη συντριπτική πλειοψηφία των περιπτώσεων τα δύο ταιριάζουν.
Ερ.: Πώς λειτουργεί η εξέταση;
Α: Βασίζεται στη χρήση μικροδορυφόρων (γνωστών και ως SSR – Simple Sequence Repeats) ως μοριακών δεικτών. Εξάγουμε το DNA και χρησιμοποιούμε την λεγόμενη αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης (PCR) για να ενισχύσουμε αυτές τις αλληλουχίες SSR. Στη συνέχεια, ελέγχουμε το μέγεθός τους μέσω αλληλούχισης και συγκρίνουμε τα μεγέθη με αυτά που υπάρχουν ήδη στη βάση δεδομένων μας.
Άλλοι μοριακοί δείκτες φαίνεται πλέον να παρέχουν ακόμη υψηλότερη ανάλυση δακτυλικών αποτυπωμάτων από τα SSR, αλλά εξακολουθούμε να χρησιμοποιούμε μικροδορυφόρους επειδή υπάρχουν ήδη πολλές βάσεις δεδομένων που βασίζονται σε αυτούς, όπως η δική μας, είναι εύκολο να ερμηνευθούν και να αναπαραχθούν, και έχουν υψηλή διακριτική ικανότητα.
Ε: Διαρκεί πολύ η εξέταση και είναι περίπλοκη η προεπεξεργασία του δείγματος;
Α: Αυτή τη στιγμή διαρκεί 7-10 ημέρες, συμπεριλαμβανομένης της ανάλυσης. Εξάγουμε το DNA χρησιμοποιώντας φυγόκεντρο, διαλύτες και εμπορικά κιτ που έχουμε προσαρμόσει, και χρησιμοποιούμε εξειδικευμένο εργαστηριακό εξοπλισμό για τη δοκιμή, ειδικά έναν θερμοκυκλοποιητή PCR και έναν τριχοειδή αλληλουχιστή. Η απαραίτητη προεπεξεργασία του δείγματος δεν είναι τόσο περίπλοκη, σχετικά μιλώντας.
Ε: Ποια πρόοδο έχετε σημειώσει τα τελευταία δύο χρόνια;
Εκτός από την επέκταση της βάσης δεδομένων, έχουμε’ βελτιστοποιήσει τη διαδικασία εξαγωγής DNA από δείγματα πετρελαίου.Χρησιμοποιούμε διάφορες μεθόδους για την εξαγωγή του DNA, μερικές από τις οποίες είναι διαθέσιμες στο εμπόριο, αλλά τις έχουμε προσαρμόσει στις ανάγκες μας, και έχουμε επίσης βελτιστοποιήσει τη διαδικασία ενίσχυσης.
Ερ.: Θα είναι αυτή η δοκιμή αρκετά οικονομικά αποδοτική ώστε να χρησιμοποιηθεί ευρέως;
Α. Η τιμή δεν έχει καθοριστεί ακόμη, καθώς δεν κάνουμε καμία εμπορική χρήση της μεθόδου μας. Ωστόσο, διαπιστώσαμε ότι υπάρχει ζήτηση για αυτήν από τον τομέα των τροφίμων και είναι’ πιθανό ότι σε περίπου έξι μήνες θα’ είμαστε σε θέση να την προσφέρουμε ως υπηρεσία και ναι, θα είναι προσιτή. Ένα μικρό δείγμα μπορεί να επαληθεύσει μια μεγάλη παρτίδα ελαίου.
Ε: Σε τι εργάζεστε τώρα;
Η δοκιμή διαρκεί πολύ, οπότε προσπαθούμε να μειώσουμε αυτόν τον χρόνο. Σχεδιάζουμε επίσης να εξετάσουμε ένα ευρύτερο φάσμα ελαιολάδων.
Επιπλέον, ενώ έχουμε καταφέρει να ανιχνεύσουμε DNA από έλαια φουντουκιού και ηλιέλαιου στο ελαιόλαδο,μέχρι στιγμής μπορούμε μόνο να επιβεβαιώσουμε την παρουσία ξένων ελαίων, αλλά δεν μπορούμε να ποσοτικοποιήσουμε την αναλογία τους, οπότε αυτό είναι κάτι στο οποίο επίσης εργαζόμαστε.
Περαιτέρω πληροφορίες σχετικά με τους μοριακούς δείκτες και την επαλήθευση της γνησιότητας του ελαιολάδου:
– Ιχνηλασιμότητα του ελαιολάδου, Γενετικό υλικό της ελιάς – Η καλλιέργεια της ελιάς, η βιομηχανία επιτραπέζιων ελιών και ελαιολάδου στην Ιταλία, Δρ. Innocenzo Muzzalupo (Εκδ.)
– Μια επισκόπηση της πιστοποίησης της γνησιότητας της ελιάς και του ελαιολάδου
– Ζώντας στη δεκαετία του ’70 – Ανίχνευση νοθείας με έλαια σπόρων, Richard Gawel
Πηγές:
Τεχνική που αναπτύχθηκε για την ανίχνευση πιθανής απάτης στο ελαιόλαδο. (Δελτίο Τύπου στα ισπανικά από το Πειραματικό Σταθμό Zaidín του Εθνικού Συμβουλίου Έρευνας της Ισπανίας.)
Καταπολέμηση της απάτης στα τρόφιμα με τη βοήθεια της επιστήμης, Chemistry World
Η ταυτοποίηση της ελιάς γίνεται γρήγορη και εύκολη, Olive Oil Times