Melhor rastreamento de DNA coloca os adúlteros de azeite em aviso prévio

Por Julie Butler
Olive Oil Times Colaboradora | Reportagem de Barcelona

Dr. Juan de Dios Alche e Dr. Fendri Mahdi

Cientistas espanhóis afirmam que estão perto de oferecer "testes de paternidade ”para o azeite virgem, que seria um poderoso aliado contra as fraudes.

Seus avanços na arte da impressão digital de DNA significam que agora eles precisam apenas de amostras relativamente pequenas - geralmente 100 - 200ml - para verificar se o azeite virgem é realmente da variedade e origem reivindicada.

E, diferentemente dos testes químicos e sensoriais - cujos resultados podem indicar fortemente que o azeite foi cortado com outro azeite vegetal -, é inequívoco encontrar o DNA do azeite de avelã ou de girassol no azeite. prova de sua presença, eles dizem.

Dr. Juan de Dios Alché, principal pesquisador do projeto do Conselho Nacional de Pesquisas da Espanha (CSIC), disseOlive Oil Times ainda há muito trabalho a fazer, mas ele espera que dentro de seis meses o teste esteja disponível comercialmente.

"Já tivemos alguns contatos de pessoas do setor de alimentos, inclusive dos Estados Unidos, e acreditamos que há muita demanda ”, disse.

Alché, do departamento de Bioquímica, Biologia Celular e Molecular das Plantas da CSIC, parte doEstação Experimental del Zaidín O instituto de Granada também explicou que complementaria substancialmente, mas não substituirá, outros testes de verificação.

Olive Oil Times: Quais são as vantagens deste teste?

Dr. Juan de Dios Alché: O azeite virgem é relativamente caro e as pessoas estão dispostas a pagar mais por qualidades que valorizam, como azeite de uma determinada região ou variedade, algo que os produtores desonestos aproveitam. Com este teste, podemos verificar a autenticidade de um azeite, atestando se realmente é da origem e variedade, ou variedades, indicadas no rótulo.

P: Quais são suas limitações?

R: Este não é um teste que vai determinar a qualidade de um azeite. Além disso, requer a detecção de DNA intacto, que muitas vezes é difícil de encontrar em azeite refinado. é uma das razões pelas quais ele foi projetado para ser usado com azeite de oliva virgem e deve ser visto como um complemento a outros testes, não um substituto.

Além disso, em alguns casos, somos incapazes de analisar positivamente as amostras porque elas têm quantidades muito, muito pequenas de DNA ou porque o DNA está degradado.Nesses casos, temos que usar amostras maiores, às vezes até o litro 1. O uso de altas temperaturas durante a moagem é uma maneira pela qual o DNA é degradado.

P: Como você chegou a desenvolver o teste?

R: Como parte de nossa pesquisa sobre pólen, desenvolvemos um grande banco de dados de fragmentos de DNA retirados das folhas de mais de 90 variedades diferentes de azeitonas, principalmente da Espanha, Portugal e Tunísia, mas também com as variedades mais comuns da Itália, Grécia, França, Marrocos e Líbano.

Um de seus usos é certificar a variedade de azeitonas das vacinas contra alergias ao pólen de oliva, mas tentamos e descobrimos que também poderíamos usá-lo para identificar o azeite, mesmo que na Espanha todo o fruto, incluindo a semente, é esmagado para produzir azeite e não sabemos exatamente de onde vem o DNA que encontramos nele.

P: Seu banco de dados é baseado no DNA das folhas das oliveiras, mas os cientistas relataram que encontrar o DNA nas folhas de uma oliveira não corresponde ao do azeite da árvore.

R. Descobrimos que na grande maioria dos casos eles coincidem.

Q. Como o teste funciona?

R: É baseado no uso de microssatélites (também conhecidos como SSRs - Simple Sequence Repeats) como marcadores moleculares. Extraímos o DNA e usamos o que é conhecido como reação em cadeia da polimerase (PCR) para amplificar essas seqüências SSR. Em seguida, verificamos seu tamanho sequenciando e comparando tamanhos com o que já está em nosso banco de dados.

Agora, outros marcadores moleculares parecem fornecer impressões digitais de resolução ainda mais alta que os SSRs, mas ainda usamos microssatélites porque já existem muitos bancos de dados baseados neles, como o nosso, são fáceis de interpretar e reproduzir, e eles têm alto poder discriminatório.

P: O teste demora muito e o pré-tratamento da amostra é complicado?

R: Atualmente, leva de 7 a 10 dias, incluindo a análise. Extraímos o DNA por meio de centrifugadora, solventes e kits comerciais customizados e utilizamos equipamentos de laboratório especializados para o teste, principalmente termociclador PCR e sequenciador capilar, o pré-tratamento de amostra necessário não é aquele complicado, relativamente falando.

P: Que progresso você fez nos últimos dois anos?

Além de expandir o banco de dados, otimizamos o processo de extração de DNA de amostras de azeite. Utilizamos vários métodos para extrair o DNA, alguns deles disponíveis comercialmente, mas personalizados por nós, e também otimizamos o processo de amplificação.

P. Este teste seria econômico o suficiente para ser amplamente utilizado?

R. O preço ainda não está determinado porque não estamos fazendo uso comercial do nosso método. Mas descobrimos que há demanda no setor de alimentos e é possível que em cerca de seis meses poderemos oferecer como um serviço e sim, seria acessível.Uma pequena amostra pode verificar um grande lote de azeite.

Q: No que você está trabalhando agora?

O teste leva muito tempo, por isso estamos tentando reduzir isso. Também planejamos testar uma gama mais ampla de azeites.

Além disso, embora tenhamos conseguido detectar o DNA dos azeites de avelã e girassol no azeite, até agora apenas podemos confirmar a presença de azeites estranhos, não podemos quantificar a proporção, então é nisso que também estamos trabalhando.

Leitura adicional sobre marcadores moleculares e verificação da autenticidade do azeite:

- Rastreabilidade do Azeite, Germoplasma da Azeitona - O Cultivo da Azeite, Azeite de Mesa e Azeite na ItáliaDr. Innocenzo Muzzalupo (Ed.)

- Uma visão geral da autenticação de oliveiras e azeites

- Viver nos anos 70 - Detectar a adulteração por azeites de sementesRichard Gawel

Fontes:

Técnica desenvolvida para detectar possíveis fraudes com azeite de oliva. (Comunicado de imprensa em espanhol da Estação Experimental de Zaidín do Conselho Nacional de Pesquisa da Espanha.)
Combate à fraude alimentar com a ciência, o mundo da química
A identificação da azeitona é rápida e fácil, Olive Oil Times